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液體ECC顯色培養基使用說明書
可同時對水樣中β-葡萄糖醛酸酶陽性大腸桿菌和大腸菌群檢測和計數
組 分
蛋白胨和酵母粉:16.0 g/L 氯化鈉:5.0 g/L 色素:4.5 g/L
pH值 7.1
操作
1、取瓶內干粉25.5 g溶于1000mL去離子水的潔凈三角瓶中,充分攪拌混勻。也可根據需要按照25.5 g/L的比例擴大或縮小制備培養基的量。
2、加熱至100℃,不停攪拌,使其*溶解。切勿加熱超過100℃,切勿121℃高壓滅菌。若使用微波爐加熱,應將培養基加熱沸騰,立即移出,輕輕搖勻,再放入微波爐加熱,觀察小氣泡變為大氣泡,直至*溶解即可。切勿使培養基溢出。
3、冷卻至室溫備用。
接種
樣品(如水樣)可按以下步驟進行:
- 將墊片A放于培養皿內。
- 用移液管移取2.0 ml制備好的培養基加入墊片A上。
- 取出膜B,將膜B置于過濾系統中。
- 將水樣置于過濾系統中抽濾。
- 取出抽濾后的膜B,將膜B放于含有墊片A的培養皿內。
- 將含有A和B的培養皿置于35±2℃恒溫培養箱中培養18-24h后即可讀取結果(注:不要倒置培養皿)。
結果
微生物(Microorganism) | 菌落顏色 |
大腸桿菌(E.coli) | 藍色 |
其他大腸菌群(Other coliform bacteria) | 紫色 |
其他革蘭氏陰性菌(Other Gram negative bacteria) | 無色或抑制 |
性能及局限
對大腸桿菌靈敏度和特異性分別為99.1%和96.9%(Ho and Tam 1997)。葡萄糖醛酸酶陰性大腸桿菌(如:大腸桿菌O157)可能出現假陰性結果,如果主要研究病原菌如大腸桿菌O157,可選用科瑪嘉大腸桿菌O157顯色培養基。若研究主要研究總大腸菌群,罕見的哈夫尼菌屬出現假陰性結果,為無色菌落。
貯存條件
干粉需保存于15℃30℃干燥環境中,在有效期前使用。制備好的液體培養基在冰箱內保存2周(2℃~8℃,避光)。
污染處理
使用過的培養基需要在121℃滅菌至少20分鐘才可以按照有關規定丟棄。